2018-11-16
PCR(聚合酶链式反应)自1985年问世以来,对生命科学产生了深远影响,广泛应用于医疗诊断、法医检测等领域。PCR通过变性、退火和延伸三个步骤,利用引物和耐热DNA聚合酶实现DNA的高效扩增。常规PCR反应包括DNA模板、引物、DNA聚合酶、dNTP和含镁离子的缓冲体系,现代PCR试剂通常将除引物和模板外的试剂预配置成Mix,简化实验操作。PCR技术的发展历程中,关键人物和事件包括沃森和克里克提出DNA双螺旋结构、Kornberg发现DNA聚合酶、Mullis发明PCR等。随着技术进步,PCR衍生出多种类型,如qPCR(定量PCR),通过荧光信号实时监测DNA扩增过程,实现精确定量分析。qPCR常用的方法有SYBR染料法、TaqMan探针法和分子信标法,各有优缺点和适用场景。